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人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒

發(fā)布時間:2020-01-07瀏覽:2663次

慧穎生物ELISA試劑盒廠家,提供人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒以及說明書,操作步驟和原理。

產(chǎn)品名稱:人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒

英文名稱:Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit

品牌:DECO

規(guī)格:48T/96T

貨號:DECO0004

儲存溫度:-20(較長時間不用時);2-8(頻繁使用時)

有效期:6個月

產(chǎn)品特點:檢測范圍廣,靈敏度高,特異性強(qiáng),精密度高,比較有針對性

品牌優(yōu)勢:提供免費(fèi)代測,專業(yè)技術(shù)工程師幫老師做均值分析,變異系數(shù)分析等


ELISA各種樣本收集、處理、保存方法

1. 血清標(biāo)本收集、處理、保存方法:

用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,全血標(biāo)本室溫放置12 h4guo夜,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

2. 血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法:

根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本,室溫混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

3. 尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法:

用干凈容器收集尿液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。

4. 唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法:

用干凈離心管收集唾液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。

5. 細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:

1)細(xì)胞培養(yǎng)上清

 取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。

2)細(xì)胞裂解液

收集細(xì)胞培養(yǎng)液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,棄去上清,用預(yù)冷的PBS0.01M,PH 7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,除去細(xì)胞碎片,取上清。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。

6. 植物標(biāo)本收集、處理、保存方法:

取適量大小組織塊(一般0.20.5 g),用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01MPH 7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分。準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(zhì)(0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.4 PBS緩沖液)于勻漿管中,冰水浴條件下,剪碎組織塊,手工勻漿或機(jī)器勻漿,制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min,取上清。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。

7. 糞便標(biāo)本收集、處理、保存方法:

 

采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4),攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。

8. 組織標(biāo)本收集、處理、保存方法:

將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。將組織塊稱重,記錄后剪碎(碎塊盡量?。?。將組織按一定的比例(通常組織重量:PBS體積=19)加入預(yù)冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿,勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中,4℃、10000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(12周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。

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ELISA試劑盒標(biāo)本及收集、貯運(yùn)要素

嚴(yán)峻溶血:以HRP為符號的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色構(gòu)成假陽性;

混有紅細(xì)胞的血清易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈

如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)生假陽性反響;

標(biāo)本凝結(jié)不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開端凝結(jié)時即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊,易構(gòu)成假陽性成果;

采血試管洗滌不*、重復(fù)運(yùn)用易穿插污染

塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性。

血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻并避免發(fā)生氣泡。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,弄清后再檢測。重復(fù)凍融會使 抗體 效價跌落,所以測 抗體 的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測,宜少量分裝冰存。

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ELISA試劑盒使用問題及解決方法:

1】:加樣量不一致?

解決方法:樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。

2】:樣品數(shù)量多少不一,加樣時間有長有短?

解決方法:重復(fù)某一樣品時,加樣時間盡可能與di yi次接近。

3】:保溫時間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致?

解決方法:重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。

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